agronaukaАграрная наука Евро-Северо-ВостокаAgricultural Science Euro-North-East2072-90812500-1396FARC North-East10.30766/2072-9081.2025.26.4.896-905agronauka-2159Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ: ВЕТЕРИНАРНАЯ МЕДИЦИНАОRIGINAL SCIENTIFIC ARTICLES: VETERINARY MEDICINEКультуральные свойства и генетическая характеристика штамма Gil-Gil вируса блютангаCultural properties and genetic characteristics of the Gil-Gil strain of the bluetongue virushttps://orcid.org/0000-0002-4435-8368ЛаптеваО. Г.LaptevaO. G.

Лаптева Оксана Георгиевна, кандидат вет. наук, старший научный сотрудник  лаборатории лекарственных средств для животных, 

ул. Академика Бакулова, стр. 1, пос. Вольгинский, Петушинский р-он, Владимирская обл., 601125,

oksana-lapteva@rambler.ru

Oksana G. Lapteva, PhD in Veterinary Science, senior researcher, the Laboratory of Drugs for Animals,

Akademik Bakulov str., building 1, Volginsky settlement, Vladimir region, 601125

info@ficvim.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5043-446XЛуницинА. В.LunitsinA. V.

Луницин Андрей Владимирович, кандидат вет. наук, зам. директора по производству и качеству,

ул. Академика Бакулова, стр. 1, пос. Вольгинский, Петушинский р-он, Владимирская обл., 601125

Andrey V. Lunitsin, PhD in Veterinary Science, Deputy Director for Production and Quality, 

Akademik Bakulov str., building 1, Volginsky settlement, Vladimir region, 601125

info@ficvim.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9615-9758ЧадаеваА. А.ChadaevaA. A.

Чадаева Анна Александровна, кандидат биол. наук, младший научный сотрудник лаборатории молекулярной вирусологии,

ул. Академика Бакулова, стр. 1, пос. Вольгинский, Петушинский р-он, Владимирская обл., 601125

Anna A. Chadaeva, PhD in Biological Science, junior researcher, the Laboratory of Molecular Virology, 

Akademik Bakulov str., building 1, Volginsky settlement, Vladimir region, 601125

info@ficvim.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5635-6677ПоволяеваО. С.PovolyaevaO. S.

Поволяева Ольга Сергеевна, кандидат биол. наук младший научный сотрудник лаборатории молекулярной вирусологии,

ул. Академика Бакулова, стр. 1, пос. Вольгинский, Петушинский р-он, Владимирская обл., 601125

Olga S. Povolyaeva, PhD in Biological Science, junior researcher, the Laboratory of Molecular Virology,

Akademik Bakulov str., building 1, Volginsky settlement, Vladimir region, 601125

info@ficvim.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3294-6602КольцовА. Ю.KoltsovA. Y.

Кольцов Андрей Юрьевич, кандидат биол. наук ведущий научный сотрудник лаборатории геномики вирусов,

стр. 1, пос. Вольгинский, Петушинский р-он, Владимирская обл., 601125

Andrey Yu. Koltsov, PhD in Biological Science, leading researcher, the Laboratory of Virus Genomics, 

Akademik Bakulov str., building 1, Volginsky settlement, Vladimir region, 601125

info@ficvim.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6801-9424ЮрковС. Г.YurkovS. G.

Юрков Сергей Григорьевич, доктор биол. наук, профессор, главный научный сотрудник лаборатории молекулярной вирусологии,

ул. Академика Бакулова, стр. 1, пос. Вольгинский, Петушинский р-он, Владимирская обл., 601125

Sergey G. Yurkov, DSc in Biological Science, professor, chief researcher, the Laboratory of Molecular Virology,

Akademik Bakulov str., building 1, Volginsky settlement, Vladimir region, 601125

info@ficvim.ruФГБНУ «Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии»РоссияFederal Research Center for Virology and MicrobiologyRussian Federation202506092025264896905Copyright © Лаптева О.Г., Луницин А.В., Чадаева А.А., Поволяева О.С., Кольцов А.Ю., Юрков С.Г., 20252025Лаптева О.Г., Луницин А.В., Чадаева А.А., Поволяева О.С., Кольцов А.Ю., Юрков С.Г.Lapteva O.G., Lunitsin A.V., Chadaeva A.A., Povolyaeva O.S., Koltsov A.Y., Yurkov S.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.agronauka-sv.ru/jour/article/view/2159

Распространение блютанга в странах северо-западной части Европы в 2023-2024 годах, вызванного высоковирулентным вирусом, относящимся к 3-му серотипу, актуализировало изучение биологических свойств штамма Gil-Gil вируса блютанга, депонированного более 50 лет назад в коллекции патогенов Федерального исследовательского центра вирусологии и микробиологии. Цель исследований – поиск наиболее пермиссивных клеточных систем для репродукции штамма Gil-Gil вируса блютанга 3-го серотипа, генетическая характеристика штамма и его серотипирование. Установлено, что вирус вызывает цитопатическое действие в клетках трёх сублиний перевиваемых культур ВНК-21/13, в перевиваемых линиях клеток ПСГК-60 и ПС. Перспективными клеточными системами для биотехнологии вакцинных препаратов определены монослойно-суспензионная культура клеток ВНК-21/13 и перевиваемая линия клеток ПСГК-60. В этих субстратах штамм Gil-Gil вируса блютанга накапливался до 7,25–7,50 lg ТЦД50/см3 . В реакции нейтрализации с референс-сывороткой подтверждена принадлежность штамма Gil-Gil к вирусу блютанга 3-го серотипа, а по результатам молекулярно-генетических исследований штамм отнесён к группе вирусов блютанга 3-го серотипа западного топотипа. Полученные результаты исследований рассматриваются как основополагающие для создания в короткий промежуток времени вакцинного препарата из охарактеризованного штамма вируса блютанга в случае заноса данного заболевания на территорию РФ.

The spread of bluetongue in the countries of north-western part of Europe in 2023-2024, caused by a highly virulent virus of serotype 3, has updated the study of the biological properties of the Gil-Gil strain of the bluetongue virus, deposited more than 50 years ago in the pathogen collection of the Federal Research Center for Virology and Microbiology. The aim of the research was to find the most permissive cell systems for the reproduction of the Gil-Gil strain of bluetongue virus of serotype 3, to characterize the strain genetically and to serotype it. The virus was found to cause cytopathic effect (CPE) in cells of three sublines of VNK-21/13 (newborn Syrian hamster kidney) transplanted cultures, in PSGC-60 (Siberian ibex kidney) and PS (saiga kidney) transplanted cell lines. The monolayer suspension culture of VNK-21/13 cells and the PSGC-60 transplanted cell line were identified as promising cell systems for the biotechnology of vaccine preparations. In these substrates, the Gil-Gil strain of bluetongue virus accumulated up to 7.25-7.50 lg TCD50/cm3. The neutralization test with reference serum confirmed that the Gil-Gil strain belonged to bluetongue virus of serotype 3, and according to the results of molecular genetic studies, the strain was included in the group of bluetongue viruses of serotype 3 of the western topotype. The obtained results are considered to be fundamental for the development of a vaccine preparation from the characterized strain of the bluetongue virus in a short period of time in case of introduction of this disease into the territory of the Russian Federation.

культура клетоккультивированиесеквенированиеинфекционная активностьцитопатическое действиеcell cultureculturingsequencinginfectious activitycytopathic effectРабота выполнена при поддержке Минобрнауки РФ в рамках Государственного задания ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр вирусологии и микробиологии» (тема № FGNM-2024-0003).The research was carried out under the support of the Ministry of Science and Higher Education of the Russian Federation within the state assignment of the Federal Research Center for Virology and Microbiology (topic No. FGNM-2024-0003).ReferencesMaclachlan N. J. Bluetongue: history, global epidemiology, and pathogenesis. Preventive Veterinary Medicine. 2011;102(2):107–111. DOI: https://doi.org/10.1016/j.prevetmed.2011.04.005Maclachlan N. J. Bluetongue: history, global epidemiology, and pathogenesis. Preventive Veterinary Medicine. 2011;102(2):107–111. DOI: https://doi.org/10.1016/j.prevetmed.2011.04.005Ries C., Vögtlin A., Hüssy D., Jandt T., Gobet H., Hilbe M. et al. Putative Novel Atypical BTV Serotype ‘36’ Identified in Small Ruminants in Switzerland. Viruses.2021;13(5):721. DOI: https://doi.org/10.3390/v13050721Ries C., Vögtlin A., Hüssy D., Jandt T., Gobet H., Hilbe M. et al. Putative Novel Atypical BTV Serotype ‘36’ Identified in Small Ruminants in Switzerland. Viruses.2021;13(5):721. DOI: https://doi.org/10.3390/v13050721MacLachlan N. J. The pathogenesis and immunology of bluetongue virus infection of ruminants. Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases. 1994;17(3-4):197–206. DOI: https://doi.org/10.1016/0147-9571(94)90043-4MacLachlan N. J. The pathogenesis and immunology of bluetongue virus infection of ruminants. Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases. 1994;17(3-4):197–206. DOI: https://doi.org/10.1016/0147-9571(94)90043-4Lorusso A., Sghaier S., Di Domenico M., Barbria M. E., Zaccaria G., Megdich A. et al. Analysis of bluetongue serotype 3 spread in Tunisia and discovery of a novel strain related to the bluetongue virus isolated from a commercial sheep pox vaccine. Infection, Genetics and Evolution. 2018;59:63–71. DOI: https://doi.org/10.1016/j.meegid.2018.01.025Lorusso A., Sghaier S., Di Domenico M., Barbria M. E., Zaccaria G., Megdich A. et al. Analysis of bluetongue serotype 3 spread in Tunisia and discovery of a novel strain related to the bluetongue virus isolated from a commercial sheep pox vaccine. Infection, Genetics and Evolution. 2018;59:63–71. DOI: https://doi.org/10.1016/j.meegid.2018.01.025Cappai S., Rolesu S., Loi F., Liciardi M., Leone A., Marcacci M. et al. Western Bluetongue virus serotype 3 in Sardinia, diagnosis and characterization. Transboundary and Emerging Diseases. 2019;66:1426–1431. DOI: https://doi.org/10.1111/tbed.13156Cappai S., Rolesu S., Loi F., Liciardi M., Leone A., Marcacci M. et al. Western Bluetongue virus serotype 3 in Sardinia, diagnosis and characterization. Transboundary and Emerging Diseases. 2019;66:1426–1431. DOI: https://doi.org/10.1111/tbed.13156Aguilar‐Vega C., Fernández‐Carrión E., Sánchez‐Vizcaíno J. M. The possible route of introduction of bluetongue virus serotype 3 into Sicily by windborne transportation of infected Culicoides spp. Transboundary and Emerging Diseases. 2019;66:1665–1673. DOI: https://doi.org/10.1111/tbed.13201Aguilar‐Vega C., Fernández‐Carrión E., Sánchez‐Vizcaíno J. M. The possible route of introduction of bluetongue virus serotype 3 into Sicily by windborne transportation of infected Culicoides spp. Transboundary and Emerging Diseases. 2019;66:1665–1673. DOI: https://doi.org/10.1111/tbed.13201Golender N., Klement E., Kovtunenko A., Even-Tov B., Zamir L., Tiomkin E. et al. Comparative Molecular and Epidemiological Analyses of Israeli Bluetongue Viruses Serotype 1 and 9 Causing Outbreaks in 2018-2020. Microorganisms. 2023;11(2):366. DOI: https://doi.org/10.3390/microorganisms11020366Golender N., Klement E., Kovtunenko A., Even-Tov B., Zamir L., Tiomkin E. et al. Comparative Molecular and Epidemiological Analyses of Israeli Bluetongue Viruses Serotype 1 and 9 Causing Outbreaks in 2018-2020. Microorganisms. 2023;11(2):366. DOI: https://doi.org/10.3390/microorganisms11020366Holwerda M., Santman-Berends I., Harders F., Engelsma M., Vloet R., Dijkstra E. et al. Emergence of Bluetongue Virus Serotype 3, the Netherlands, September 2023. Emerging Infectious Diseases. 2024;30(8):1552–1561. DOI: https://doi.org/10.3201/eid3008.231331Holwerda M., Santman-Berends I., Harders F., Engelsma M., Vloet R., Dijkstra E. et al. Emergence of Bluetongue Virus Serotype 3, the Netherlands, September 2023. Emerging Infectious Diseases. 2024;30(8):1552–1561. DOI: https://doi.org/10.3201/eid3008.231331Boender G.-J., Hagenaars T. J., Holwerda M., Spierenburg M. A. H., van Rijn P. A., van der Spek A. N., Elbers A. R. W. Spatial transmission characteristics of the bluetongue virus serotype 3 epidemic in the Netherlands, 2023. Viruses. 2024;16(4):625. DOI: https://doi.org/10.3390/v16040625Boender G.-J., Hagenaars T. J., Holwerda M., Spierenburg M. A. H., van Rijn P. A., van der Spek A. N., Elbers A. R. W. Spatial transmission characteristics of the bluetongue virus serotype 3 epidemic in the Netherlands, 2023. Viruses. 2024;16(4):625. DOI: https://doi.org/10.3390/v16040625King S., Nicholls M., Scales J., Gubbins S., Pearce-Kelly P., Saverimuttu S. et al. The efficacy of vectorproof accommodation for the protection of livestock against Culicoides biting midges. Parasites & Vectors. 2025;18:108. DOI: https://doi.org/10.1186/s13071-025-06736-9King S., Nicholls M., Scales J., Gubbins S., Pearce-Kelly P., Saverimuttu S. et al. The efficacy of vectorproof accommodation for the protection of livestock against Culicoides biting midges. Parasites & Vectors. 2025;18:108. DOI: https://doi.org/10.1186/s13071-025-06736-9Van den Brink K. M. J. A., Santman-Berends I. M. G. A., Harkema L., Scherpenzeel C. G. M., Dijkstra E., Bisschop P. I. H. et al. Bluetongue virus serotype 3 in ruminants in the Netherlands: Clinical signs, seroprevalence and pathological findings. VetRecord. 2024;195(4):e4533. DOI: https://doi.org/10.1002/vetr.4533Van den Brink K. M. J. A., Santman-Berends I. M. G. A., Harkema L., Scherpenzeel C. G. M., Dijkstra E., Bisschop P. I. H. et al. Bluetongue virus serotype 3 in ruminants in the Netherlands: Clinical signs, seroprevalence and pathological findings. VetRecord. 2024;195(4):e4533. DOI: https://doi.org/10.1002/vetr.4533Voigt A., Kampen H., Heuser E., Zeiske S., Hoffmann B., Höper D. et al. Bluetongue Virus Serotype 3 and Schmallenberg Virus in Culicoides Biting Midges, Western Germany, 2023. Emerging Infectious Diseases. 2024;30(7):1438–1441. DOI: https://doi.org/10.3201/eid3007.240275Voigt A., Kampen H., Heuser E., Zeiske S., Hoffmann B., Höper D. et al. Bluetongue Virus Serotype 3 and Schmallenberg Virus in Culicoides Biting Midges, Western Germany, 2023. Emerging Infectious Diseases. 2024;30(7):1438–1441. DOI: https://doi.org/10.3201/eid3007.240275Voigt A., Kampen H., Heuser E., Zeiske S., Hoffmann B., Höper D. et al. Emergence of bluetongue virus serotype 3 in western Germany, October 2023, and ad-hoc monitoring in Culicoides biting mides. BioRxiv. 2024. 8 p. DOI: https://doi.org/10.1101/2024.02.26.582175Voigt A., Kampen H., Heuser E., Zeiske S., Hoffmann B., Höper D. et al. Emergence of bluetongue virus serotype 3 in western Germany, October 2023, and ad-hoc monitoring in Culicoides biting mides. BioRxiv. 2024. 8 p. DOI: https://doi.org/10.1101/2024.02.26.582175Newbrook K., Obishakin E., Jones L. A., Waters R., Ashby M., Batten C., Sanders C. Clinical disease in British sheep infected with an emerging strain of bluetongue virus serotype 3. VetRecord. 2025;196(4):e4910. DOI: https://doi.org/10.1002/vetr.4910Newbrook K., Obishakin E., Jones L. A., Waters R., Ashby M., Batten C., Sanders C. Clinical disease in British sheep infected with an emerging strain of bluetongue virus serotype 3. VetRecord. 2025;196(4):e4910. DOI: https://doi.org/10.1002/vetr.4910Barros S. C., Henriques A. M., Ramos F., Luís T., Fagulha T., Magalhães A. et al. Emergence of Bluetongue Virus Serotype 3 in Portugal (2024). Viruses. 2024;16(2):1845. DOI: https://doi.org/10.3390/v16121845Barros S. C., Henriques A. M., Ramos F., Luís T., Fagulha T., Magalhães A. et al. Emergence of Bluetongue Virus Serotype 3 in Portugal (2024). Viruses. 2024;16(2):1845. DOI: https://doi.org/10.3390/v16121845Golender N., Bumbarov V., Eldar A., Lorusso A., Kenigswald G., Varsano J. S., Savini G. Bluetongue Serotype 3 in Israel 2013–2018: Clinical Manifestations of the Disease and Molecular Characterization of Israeli Strains. Frontiers in Veterinary Science. 2020;7:00112. DOI: https://doi.org/10.3389/fvets.2020.00112Golender N., Bumbarov V., Eldar A., Lorusso A., Kenigswald G., Varsano J. S., Savini G. Bluetongue Serotype 3 in Israel 2013–2018: Clinical Manifestations of the Disease and Molecular Characterization of Israeli Strains. Frontiers in Veterinary Science. 2020;7:00112. DOI: https://doi.org/10.3389/fvets.2020.00112WOAH Terrestrial Manual 2021. Chapter 3.1.3. – Bluetongue (infection with bluetongue virus). 2021. pp. 1-20. URL: https://www.woah.org/fileadmin/Home/fr/Health_standards/tahm/3.01.03_BLUETONGUE.pdfWOAH Terrestrial Manual 2021. Chapter 3.1.3. – Bluetongue (infection with bluetongue virus). 2021. pp. 1-20. URL: https://www.woah.org/fileadmin/Home/fr/Health_standards/tahm/3.01.03_BLUETONGUE.pdfБалышева В. И., Нестеров Е. А., Луницин А. В., Живодеров С. П., Горшкова Т. Ф., Лаптева О. Г. и др. Эффективность трехвалентной инактивированной вакцины против блютанга для мелкого и крупного рогатого скота. Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 2013;(4):49–51. Режим доступа: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=19124962 EDN: QCNHQPBalysheva V. I., Nesterov E. A., Lunitsin A. V., Zhivoderov S. P., Gorshkova T. F., Lapteva O. G. et al. Efficacy of a trivalent inactivated vaccine against luetongue cantle and small ruminants. Doklady Rossiyskoy akademii sel'skokhozyaystvennykh nauk = Reports of the Russian Academy of agricultural sciences. 2013;(4):49–51. (In Russ.). URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=19124962Лаптева О. Г., Филатова М. А., Нестеров Е. А. Репродукция вирусов блютанга и бешенства в различных сублиниях клеток ВНК-21/13. Актуальные проблемы инфекционной патологии ветеринарной медицины: мат-лы конф. молодых ученых. Покров: ВНИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии, 2009. С. 200–206.Lapteva O. G., Filatova M. A., Nesterov E. A. Reproduction de virus de Bluetooth et de rage dans diverses sous-lignées de cellules de VNK-21/13. Problèmes actuels de pathologie infectieuse de la Médecine vétérinaire: Jeunes scientifiques. Pokrov: VNII veterinarnoy virusologii i mikrobiologii, 2009. pp. 200–206.Балышева В. И., Сливко В. В., Жестерев В. И. Культивирование вируса блютанга в культурах кле ток животных. Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 2002;(6):46–48.Balysheva V. I., Slivko V. V., Zhesterev V. I. Culture du virus de Bluetooth dans des cultures de cellules animales. Doklady Rossiyskoy akademii sel'skokhozyaystvennykh nauk = Reports of the Russian Academy of agricultural sciences. 2002;(6):46–48. (In Russ.).Maan S., Maan N. S., Samuel A. R., Rao S., Attoui H., Mertens P. P. C. Analysis and phylogenetic comparisons of full-length VP2 genes of the 24 bluetongue virus serotypes. Journal of General Virology. 2007;88(2):621– 630. DOI: https://doi.org/10.1099/vir.0.82456-0Maan S., Maan N. S., Samuel A. R., Rao S., Attoui H., Mertens P. P. C. Analysis and phylogenetic comparisons of full-length VP2 genes of the 24 bluetongue virus serotypes. Journal of General Virology. 2007;88(2):621– 630. DOI: https://doi.org/10.1099/vir.0.82456-0

The authors declare that there are no conflicts of interest present.